一。介绍：

本核酸酶抑制剂复合物为多成分的复合制剂，与表面活性剂的协同作用下，能够快速渗透到细胞内，比传统方法更能快速地帮助抑制剂与细胞内的核酸酶结合，从而实现快速稳定核酸，防止降解。本核酸酶抑制剂复合物为专利产品，已为好几大病毒保存液厂家所采用，能够提供产品的竞争力，也能有效降低目前市场上异硫氰酸紧缺的影响。

二，实验测试：

通过对比含150g/L本核酸酶抑制剂复合物的保存液，与传统3M异硫氰酸胍配方的保存液保存假病毒核酸稳定性，来评价本核酸酶抑制剂复合物的有效性。

1. 制备保存液

2.实验流程

假病毒核酸制备：用咽拭子在正常人口腔采样后，用4ml生理盐水浸泡拭子，剧烈涡旋1min后丢弃拭子，加入100ul新冠假病毒（滴度108）涡旋混匀。取200ul含假病毒的拭子浸泡液加入到1ml上述配制的保存液（第一组及第二组）离心管中，混匀后于室温保存。于24h、72h、120h后分别取200ul保存液用GBCBIO公司的Virus DNA/RNA Kit进行核酸提取，最后用100ul RNase-free Water洗脱。核酸提取完后采用疾控中心推荐的引物即进行qRT-PCR检测。

3.结果

保存24h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值29.668 ；29.207 ；26.496 ；24.534；23.863；24.395；34.504；33.191；32.559；32.316；34.816

保存24h后保存液 1-11 N基因的扩增曲线与CT值27.832；25.488；24.684；24.707；24.293；24.637；34.934；33.848；33.543；30.785；35.090

保存72h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值30.887；30.730；29.973；24.887；25.918；27.855；33.777；31.918；31.598；31.402；33.988

保存72h后保存液 1-11 N基因的扩增曲线与CT值 31.660；30.746；28.582；25.699；26.855；28.613；34.137；32.910 ；32.309；31.879；36.434

保存120h后保存液1-11   ORF1ab基因的扩增曲线与CT值

32.746；32.230；31.918； 30.074；30.246；26.316；33.902；33.293；33.176；31.918 ；35.887

4.结论

使用本核酸酶抑制剂复合物的保存液在低至0.1M异硫氰酸胍时比传统配方的3M异硫氰酸胍的效果还要好，如果用150g/L复合物与0.5M异硫氰酸胍就显著优于传统配方。

三、灭活病毒效果测试

用HSV-1与EV71病毒来测试保存液对病毒的灭活效果，测试显示使用低至0.5M异胍与150g/L的核酸酶抑制剂复合物能够有效灭活病毒。